胰蛋白酶（豬胰）

CAS:9002-07-7

英文名稱：Trypsin（porcine pancreas）
CAS號(hào)：9002-07-7
分子量:23300
效價(jià)：1：250
活力：≥250U/mg
干燥失重：≤5.0%
性狀：由豬胰提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶，淡黃色粉末。不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。等電點(diǎn)pI 10.5。Ca2+對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈抑制
溶解方法1：用90ML無(wú)Ca、Mg離子PBS溶解胰蛋白酶，再加該P(yáng)BS至100ML（該酶溶解較難，必要時(shí)在4度過(guò)夜以便溶解）。用時(shí)調(diào)PH7.2左右，用5.6%NaCO3調(diào)
溶解方法2：維持反應(yīng)鍋內(nèi)溶液80℃的溫度至少半小時(shí)，然后由夾層通入自來(lái)水降低鍋內(nèi)溶液溫度至 50 ℃，按 1∶30的酶／底物比加入需要量的胰蛋白酶，在攪拌器連續(xù)攪拌下開(kāi)始酶解反應(yīng)，期間調(diào)整通入反應(yīng)鍋夾層的蒸汽量使溫度維持在50℃。酶解反應(yīng)過(guò)程中，為保證胰蛋白酶的zui大生物活性使反應(yīng)液的pH維持在8．0，這就需要不斷在反應(yīng)液中加入NaOH稀溶液。自加入胰蛋白酶起6h后酶解反應(yīng)結(jié)束
溶解方法3：準(zhǔn)確稱取NaCl 8.00g，KCl 0.40g、Na2HPO4•7H2O 0.09g、KH2PO4 0.06g、酚紅0.01g、NaHCO3 0.35g，溶解于約800mL五蒸水中，充分溶解后定容至1000mL，分裝，滅菌備用，制成D-hanks液。準(zhǔn)確稱取胰蛋白酶0.125g，溶解于100mL D-hanks液中 ，于4℃過(guò)夜，過(guò)濾分裝，-20℃保存?zhèn)溆?br />用途：科研、實(shí)驗(yàn)。專一性催化水解賴氨酸、精氨酸羧基形成的肽鍵，可用于蛋白質(zhì)化學(xué)研究
保存：2～8℃




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